交互模拟 · 6,7-V 固体培养基配制

植物组织培养基的配制

围绕母液配制红线、2 L 培养基配制流程与灭菌操作设计，通过点击认知、步骤排序和正误判断，把"沉淀、溶解、调pH、灭菌"四个易错环节记牢。

演练路线

共 5 个模块，顺序不限，建议从上到下。

培养基组成

点组分看作用与红线

配制步骤排序

2L 培养基流程

易错判断

6 道操作题

参数速查

母液用量与灭菌参数

注意事项清单

一图带走

重新演练

清空得分

① 培养基由什么组成

植物外植体生长所需营养通常包括五类。点击卡片看作用与配制红线。

大量元素

N、P、K、Ca、Mg、S

微量元素

Fe、Mn、Zn、B、Mo、Cu、Co、I

有机物

维生素、肌醇、氨基酸、附加物

植物生长调节剂

6-BA、KT、NAA、IAA、2,4-D 等

凝固剂 / 碳源

琼脂 0.7%、蔗糖 2.5%

水

蒸馏水，精细实验用双蒸水

请点击上方卡片：先看"大量元素"——这里藏着最容易出沉淀的红线。

沉淀红线：硫酸镁、氯化钙必须单独配成母液——高浓度钙离子、镁离子与磷酸盐混合会生成不溶性沉淀；铁盐也易沉淀，须用 Na₂-EDTA 螯合后单独配制。

② 2 L 6,7-V 固体培养基 · 步骤排序

按讲义操作顺序，点击左侧步骤加入你的流程；点已排片段可撤销。手机上为上下两栏。

可选步骤

你的配制流程

关键细节：琼脂必须在电炉上加热、全程搅拌至完全溶解；母液与蔗糖、大豆蛋白胨在琼脂溶化后再加入；先定容、后用 0.1 M HCl/NaOH 调 pH。

③ 配制操作易错判断

每题选一个答案，选完立即显示解析。

④ 关键参数速查

配 2 L 6,7-V 固体培养基时的实际用量与母液配方（摘自讲义）。

吸取母液（加入 500 mL 烧杯）

母液	用量
大量元素	20 mL
微量元素	20 mL
铁盐	10 mL
烟酸	2 mL
氯化钙	4.4 mL
肌醇	4 mL
VB₁ / VB₆	各 2 mL
NAA / IAA	各 2 mL
KT	0.2 mL

称量与工艺参数

项目	数值
蔗糖（2.5%）	50 g
琼脂粉（0.7%）	14 g
大豆蛋白胨	2 g
定容体积	2 L
pH 调节范围	5.8～6.2
分装	250 mL 瓶 / 约 100 mL
高压灭菌	121 ℃ / 25 min

激素溶解区别：NAA、IAA 等生长素类先用少量乙醇溶解再加水；6-BA、KT 等细胞分裂素类用稀盐酸溶解。母液均 4 ℃ 冰箱保存，用前检查有无沉淀或变色。

⑤ 配制注意事项清单

对照自查，也是两道思考题的答题要点。

培养基 = 大量元素 + 微量元素 + 有机物 + 植物生长调节剂 + 水；加琼脂为固体培养基，不加为液体培养基。
常用基本培养基：MS、White、N6、B5 等；试剂用分析纯（AR）或化学纯（CP），水用蒸馏水/双蒸水。
大量无机盐一般配 10 倍母液；用量大时可配 100 倍，但易沉淀。
硫酸镁、氯化钙必须单独配制——高浓度钙、镁离子与磷酸盐共存会产生不溶性沉淀。
铁盐易沉淀，用 Na₂-EDTA + FeSO₄ 单独配成螯合铁母液。
微量元素、有机物配成 100 倍母液，冰箱保存。
NAA、2,4-D 等生长素用少量乙醇助溶；6-BA、KT 等细胞分裂素用稀盐酸助溶。
配制前先检查母液是否沉淀、变色，严禁使用已失效母液。
琼脂需在电炉上加热并持续搅拌至完全溶解，防止糊底。
先加母液与蔗糖、蛋白胨，溶解后定容至 2 L，再用 HCl/NaOH 调 pH 至 5.8～6.2。
分装后棉塞 + 牛皮纸包扎，121 ℃ 高压灭菌 25 min；取出平放，待琼脂自然凝固成接种平面。